ELISA試劑盒實驗的影響因素

咱們技術(shù)人員通過幾年的試驗調(diào)查，以為影響ELISA試驗的要素有如下三方面：
一、試劑盒
1、抗原、抗體活性對效價的影響：主要是試劑中抗體（或抗原）的效價下降或失活，成果不易判別。再有ELISA試劑盒靈敏度高，對雜質(zhì)的反響靈敏度也高，試驗中空白對照OD值偏高或假陽性；
2、酶物濃度過高，也會致使OD值假性增高。
二、ELISA試劑盒試驗儀器
1、加樣器是不是通過校正，酶免測定血清用血量很少，如手工加樣器的功能欠好，汲取樣品不，會使成果忽高忽低；
2、每次洗板前，應(yīng)查看洗板機(jī)針孔有無堵塞。
三、操作
1、檢查前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后運(yùn)用，試劑用完及時放回冰箱冷藏，避免形成試驗成果假性下降；
2、加樣時留意勿觸及包被板底部，避免擦傷包被物使抗體（抗原）掉落而影響試驗成果的性；
3、洗刷不充分，會使成果假性增高，過分洗刷呈假陰性；
4、比色時應(yīng)堅持包被孔底部無異物、無水汽，特別是冬天板從37℃水浴箱取出時，底部留有水汽，應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色，水汽或孔內(nèi)氣泡也會使OD值增加；
5、抗原與抗體反響到達(dá)*平衡，依賴于溫度與時刻。溫度高于45℃易引起失活及符號物掉落，溫度低于4℃，影響反響速度。
總歸，由于ELISA試劑盒試驗的影響要素較多，在實際工作中有必要操作標(biāo)準(zhǔn)、細(xì)心，避免和掃除各種要素的影響，使之得到牢靠的查驗成果。